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必须了解的抗体检测试剂盒基础知识
发布时间:2019-08-08 点击次数:84次
   必须了解的抗体检测试剂盒基础知识
  抗体检测试剂盒用纯化的抗原包被微孔板,往包被抗体的微孔中同时加入酶标的抗体和待测抗体,被测抗体与酶标记抗体对特异性抗原进行竞争结合。经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。待测标本浓度越高,标记抗体和抗原的结合就越受到抑制,显色愈浅。显色的深浅与酶量呈正相关,而与样品中待测物质含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  今天小编要为各位带来的是抗体检测试剂盒相关事项说明说明:
  1、只有全部使用抗体检测试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守抗体检测试剂的试验说明才会得到较佳的检测结果。
  2、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
  3、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
  4、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
  操作抗体检测试剂盒需注意:
  1、不同厂家生产的抗体检测试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照抗体检测试剂盒说明书严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性.
  2、若不同批号抗体检测试剂盒的不同组分(a液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。
  3、反应时间的误差,做大量标本时,孔和后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
  4、临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
  5、加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。

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